bgkedfort.ru

Инфекциозен ларинготрахеит на птиците - инфекциозни заболявания - инфекциозни - вирусни, птичи заболявания

Инфекциозен ларинготрахеит на птиците

Инфекция laringotraheitptits (ILT) Infectiose ларинготрахеит де Huhnes, инфекции ларинготрахеит, Laryngotracheite infectieuse (FR). (Това.) (Ang.) - вирусен kontagiozanaya респираторно заболяване засяга пилета, пуйки, фазани е описан за първи път през 1925 май и Titsler наречени инфекциозен бронхит C 1931 той става известен като инфекциозен ларинготрахеит. Регистрирани във всички страни на света, където развитието на промишленото птицевъдство.

Информация за патогена. Вирусът първо е изолирал бук през 1930 г. в САЩ

Морфология и химичен състав. Геномът на ILT вируса има дължина от 155 000 стръкове, състоящи се от дълга уникална последователност от 1D (120 000 bp) и кратка уникална последователност от Us (17 kbp). ILT вирусни гликопротеини са изолирани от инфектираните клетъчни екстракти и се пречистват чрез афинитетна хроматография лектин 83% гликопротеини защитени птици от инфекцията на инфлуенца вирус. Гликопротеин В (gB) е първият структурен протеин на птичия ILT вирус. Клониран, генът на този протеин се секвенира.

Стабилност. Вирусът е чувствителен към липолитични агенти, топлина и различни де zinfektantam Той постоянно запазва своята активност vliofilizirovannom форма или - 20-60 ° С Температура 55 ° С унищожава вируса в рамките на 10-15 минути и 38 ° С - 48 часа на вирус-съдържаща пиле трахеална вирус слуз пациент е унищожена в 44 часа при температура 37 ° с, и в HAO при 25 ° с в продължение на 5 часа патологичен материал (трахея от болни пилета) при температура от - 8-10 ° с се поддържа над 370 дни в замразени трупове на пациенти и принудени убити пилета, съхранявани при температура -1 0, 18, 28 ° С, вирус остават активни за повече от 19 месеца, на повърхността на черупката в termostatain активира при 12 часа и продължава до 9 дни напълно инактивирани в 1% разтвор креолски на 30% в инфектираните птици къщи

AH вариабилност и отношение. Всички птичи херпес на базата на досиета RN групирани в 11 различни групи. Вирусни щамове ILT различават по вирулентност за домашни птици и ТВЕ тропизъм, скоростта на екскреция на клетки в тъканна култура, стабилност при съхранение, авидитет, молекулни структурни характеристики на имунологични разлики бяха намерени между вирус ларинготрахеит щамове, въпреки че някои отклонение в способността да се неутрализира чрез хиперимунен серум описано в щамове с различна вирулентност.

Локализиране на вируса. Вирусът се среща главно в дихателните пътища, в по-малко количество в черния дроб и далака. Когато интратрахеално инфекция ден 30 пилета му бяха изолирани от трахеята и носните проходи 7 дни при ректална инфекция намерени в бурсата на Fabricius и трахеята на 3 дни. Птиците, които оздравяват птици, имат дългогодишен носител на вируси. От трахеята на болните птици вирусът бе разпределен 2 дни. След острата фаза на ILT, може да възникне латентен период при запазването на генетичния материал на вируса в ДНК на ганглийните клетки на тригеминалния нерв. При различни влияния, инфекцията може да реактивира с освобождаването на вируса във външната среда.

AG дейност. ВНА при инфектирани пилета се появяват 2-3 седмици след заразяването, техният титър достига максимум до 5-ия ден и продължава до 8-21 месеца.

Експериментална инфекция. Заразяват чувствителни птици лесно, съдържащ вируси материал чрез приложение върху лигавицата на ларинкса, трахеята, очите, носа, синусите и инфраорбитална клоаката. На 6-12 дни при инфектираните пилета се развиват типични симптоми на заболяването. В продължение на 3-10 дни след трахеалното инокулиране на вируса, кокошките носачки показват признаци на леко респираторно заболяване. На 4-ия ден се открива вирус в трахеята и назалната тъкан. Между 19 и 59 дни след инфекцията вирусът се открива периодично от DSM. Ганглия на тригеминалния нерв е основното място на локализирането на вируса. Експериментално инфектирана ваксина SPF пилета бр. SA-2 вирус ILT вирус AG в трахеалното промиване се определя до седмия ден след заразяването и АТ срещу вируса в трахеалното промиване от 5-ия ден след инфекцията. Имуноглобулините от клас А се появяват на шестия ден след заразяването и VNA - само на 14-ия ден. Вирусът причинява заболявания при пуйки на възраст 3-4 седмици и 2-10 месеца. Болните пуйки могат да бъдат източник на замърсяване с пиле. Данните за гълъби са податливи противоречиви Пауни и фазани са податливи на вируса, и фазани чувствителност е по-висока зайци, морски свинчета и бели плъхове са устойчиви.

Изолация на вируса. При експериментални условия заразените птици започват да отделят вируса 8 дни след заразяването. Периодът на преинфекциране може да продължи 2 дни и вирусната изолация се наблюдава в продължение на 6 дни. Клиничните признаци при заразените птици обикновено се появяват в продължение на 6 дни. В тялото на болните птици ILT вирусът, както и много други херпесни вируси, може да бъде латентен. Полевите щамове, като ваксини, притежават свойството да продължават да съществуват в нервната система. Вирусът на ваксината лесно се предава хоризонтално. Следователно, когато се използва ваксината, е по-добре да се имунизират всички пилета в птицефермата.

Отглеждане. Вирусът се отглежда Хао мацка, патици, пуйки, някои първични и непрекъснати клетъчни култури, а не развитието на ембрионите гълъби и морски птици. Hao образуват фокални лезии 2 вида krupnouzelkovye с непрозрачен бял център и периферията inekroticheskim melkouzelkovye - без некроза. Нодуларна лезии се появяват на цялата повърхност Хао, фокусна точка в момента inokulyatsiivirusa. На HAO инфектираните клетки се образуват Вътрешноядрен включвания и понякога гигантски клетки. култури РК линии, на FJ, клетки от пилешки ембрионални фибробласти, пилета, патици, бъбречни свински ембриони, новородени зайци вируса причинява 3-4 дни CBI, характеризиращи се с закръглена и песъчинки клетъчен лизис, последвано от тяхното изключване. В клетките се формират SPEV цитоплазмични включвания и се формират много ядрени клетки. Вътреклетъчните включвания се откриват след 12 часа и достигат най-високата концентрация 30-36 часа след инфекцията. В инфектираните клетъчни култури вирусът предизвиква образуването на плаки.

GA свойства. Вирусът, който се възпроизвежда в СЕ, няма активност в GA. Понякога се проявява в случай на култивиране на вируси в първичната култура на бъбреците на пилетата.

Епизоотологични характеристики. Източници и начини на предаване на инфекцията. Източникът на инфекцията, и е бил малтретиран -bolnaya ILT птица, която за дълго време (над 2 години) е вирус. Вирусът от болни птици могат да бъдат изолирани в продължение на 7 дни след появата на симптомите, а след това се възстанови от отделни птици остават носители на вируса и от време на време хвърлят на вируса, а не непременно в същото време с преминаването на заболяването в клиничната форма. Инфекцията може да възникне и по полов път. Възможно е вирусът да се предава чрез заразена яйцевидна обвивка. В инкубатор вирусът остава инфекциозен до 96 часа. След обработка на яйцата с формалдехидни пари, той умира след 40 минути. След острата фаза на инфекцията може да се случи латентен период с опазване на генетичния материал на вируса в ДНК на клетките на тригеминалния ганглий. При различни влияния, инфекцията може да реактивира с освобождаването на вируса във външната среда. Благоприятен фактор по отношение на премахване на инфекция в птицеферми са висока степен на видовата специфичност на вируса, необходимостта от близък контакт на пилетата за разпространението на инфекцията, бързото инактивиране на вируса е птичи организъм, генетичната стабилност на вируса, липсата на вирусната репликация в трахеята в присъствието на специфична локална клетъчно-медииран имунитет.

Спектърът на патогенност in vivo. In vivo, вирусът засяга пилета от всички възрасти. Фазаните и пуйките също са чувствителни към ILT вируса

Клиничните признаци и диапазони патологични изменения .Inkubatsionny период от 2 до 30 дни. Неговата продължителност зависи от вирулентността на дозата на вирус, метода на въвеждане в тялото и физиологичното състояние на птиците. Най-краткият инкубационен период. равно на 40 часа. маркирани с интратрахеално инфекция. Болестта протича супер бързо, остро и хронично. Разграничаване лека и атипична форма на заболяването, и локализиране на лезии и конюнктивата -laringotrahealnuyu форма. Първият обикновено се развива остро и се придружава от кашлица, задушаване, хриптящо дишане. Катарален или фибринозен възпаление на лигавиците може да се наблюдава в носните синуси iinfraorbitalnyh на лигавицата в тези случаи подути хиперемичната, понякога надупчена с малки точковидни кръвоизливи. В polostina устната лигавица може да бъде намерен лесно разделени нападения белезникав локализирани в основата на езика, в ъглите на човката, кръг небе и на входа на ларинкса и фаринкса В някои случаи има катарален фарингит аутопсия промени са главно в ларинкса и трахеята. В лумена на ларинкса се открива каучуков корк. След отстраняването му gortaninerovnaya лигавица, червеникав, подути, сгъсти. Конюнктивата форма е по-често при пилета и се характеризира с катарален конюнктивит или фибринозен. Тази форма може да се получи само с лезии на конюнктивата или в комбинация с laringotrahealnoy форма на заболяването В някои птици отбелязват окото оток, особено ниски Някои кокошки и пилета разработени фибринозен възпаление на конюнктивата с отлагане в конюнктивалния сак fibrinopurulent казеоза залепване г. помътняване на роговицата, понякога с развитие на пантофталмит. Промените в белите дробове с ILT обикновено се срещат при малък брой птици. В някои случаи те са ограничени до бронхит, който се развива катарален, фибринозен възпаление рядко, понякога в лумена на бронхите откриване на кръвни съсиреци или fibrinopurulent сирене тапи.

Най-типичните признаци на ILT са били докладвани при бройлери на възраст 4-7 седмици, а при кокошки носачки на възраст 18-76 седмици. В някои случаи, водата временно с бронхит разкрие катарална пневмония в малки сиви уплътнителните региони, понякога с малки огнища на некроза жълтеникава поражение на алвеолите е сравнително рядко, обаче, с експерименталното възпроизвеждане на инфекция, особено когато през трахеята метод за инфекция, aerosakkulit често намират значителен брой птици. Стената на алвеолите в или дифузна лезии сгъсти, частично или напълно непрозрачен прелива кръвни нейните кораби. торбички кухина въздух са пенливи серозен ексудат съсирена fibrinaili зърна fibrinopurulent казеоза на трахеята епителните клетки след 12 часа след инфекцията са Вътрешноядрен включвания от тип А. В типичен хомогенна оцветяване те представляват, и когато открива посребряваше argininofilnye гранули.

Когато laringotrahealnoy форма на специфични промени на заболяването, отбелязани в ларинкса и трахеята. Лигавицата на тези органи хиперемия, оток, ерозирали, с кръвоизливи и да ги просвети често изпълнен с катарални или катарална-хеморагичен ексудат. В повечето случаи, на ларинкса са fibrinopurulent сирене маса, включване лумена. В някои ензоотична намери катар лигавицата obolocheknosovoy и устата, и на корена на езика и юзда фибринозни nalozheniya.U някои пилета разширяване на далака, катар на тънките черва, бурсата на Fabricius и клоака. При бронхите и белодробните лезии се срещат рядко, под формата на катарална бронхопневмония. Когато конюнктивата форма празнуват конюнктивит серозен и фибринозен отлагане в конюнктивалния meshokkazeoznyh тегло, намаляване на прозрачността на роговицата и лезия очната ябълка.

Хистологични промени. Съответства на снимката на аутопсията. Ларинкса и трахеята са серозен-катарален, фибринозен хеморагичен или мукозит. В началото на заболяване разкрие хиперемия съдове дистрофия повърхност епител и оток на лигавицата, по-късна дата некроза и десквамация на дихателните епителен, лигавицата или инфилтрира mfoidno-хистиоцитен елементи и п-rivaskuyayarnye кръвоизлив. В някои области на некротична лигавицата случва с хрущял пръстен. Вирусът се репликира в епителните клетки на лигавицата на ларинкса, трахеята, конюнктивата, алвеолите на белите дробове, клоаката и хората с възпалителна реакция форми Вътрешноядрен включвания. Включва открити преди началото на епителна некроза между 1-5-ия ден след инфекцията. Тяхната форма е кръгла, овална или продълговата, брой 1-4 в леглото. заобиколен от светлинен ръб. Описани спонтанно масивни некротични лезии на тимуса, далака и бурсата на Fabricius в 40-дневни пилета бройлери с признаци на анемия. Аутопсията показва, намаляване на размера на тимуса и бурсата на Fabricius, който имаше тъмно жълт или кафяв цвят, има също дифузен adenoektaziya жлезиста огнища zheludka.Pri наблюдава Хистологично фибрин-гнойно възпаление inekroza в тимуса, фабрициева жлеза и далака В лимфоцити и хистиоцити тези органи намерени единични големи вътрешнонуклеарни кръвни телца. Използване на трансмисионна електронна микроскопия подути сърцевините на периферна позиция хистиоцити тимус хроматин записани от присъствието на херпес частици. В остро заболяване вируса ILT в 85-86% от случаите, открити в заразените клетки на трахеята и ларинкса, до 80-88% - в инфектираните клетки, голям бронхите и само на 60 - 62% - в инфектираните клетки с малка бронхите и бронхиолите. ILT вирус в 76-84% от случаите може да се изолира от тампони на назофаринкса, ларинкса и трахеята. В субакутен и хронични течения в положителен rezultatypoluchali проучване ларинкс и трахеята на инфектираните клетки (96%) на бронхите и бронхиолите (85%) тампони на назофаринкса, ларинкса, трахеята (72-86%), стомашно-чревния тракт (до 60%) и черния дроб (8 -12%). Така, в хроничния ход на заболяването, положителните резултати за изолиране на ILT вируса са по-високи, отколкото в неговия остър ход, с изключение на черния дроб. По този начин диагностичната надеждност на метода на изолиране на вируса по време на изследването на птичи органи с различна степен на тежест на патологичните промени варира от 85% (в остър курс) до 96% (при субакутен и хроничен ход на заболяването). Въпреки това, метод проливането, притежаващ висока специфичност има значителен недостатък - значителен период от време (до 45-52 дни).

Патогенеза. Вирусът влиза в тялото през конюнктивата, назално или устната кухина и се възпроизвежда в епителните клетки на лигавицата на ларинкса и трахеята, причинявайки серозен-катарален възпаление и образуване на Вътрешноядрен включвания. Vporazhennyh епителни клетки е пролиферация ядра bezdeleniya цитоплазмата. След 24 часа от лезиите вирусът влиза в кръвоносната система. На този етап на заболяване показват дистрофия, некроза и десквамация на епитела на лигавицата на дихателните пътища, и в лумена трахеята мукозните ексудати с кръв. С по-нататъшния ход на лигавични заболяване лезии на ларинкса и трахеята на Засилват се не само от действието на вируса, но също така и в резултат на процесите, които протичат в него izmeneniy.Otmechayut дегенеративно стесняване на лумена на дихателните пътища и често сирене образуването на задръствания, което води до пълно запушване и щампите птици от задушаване ,

Диагнозата се основава на епизоотични данни, клинични признаци на заболяването и лабораторни открития. Често заболяването се среща нетипично, характерните му признаци са слабо изразени или несъществуващи. В такива случаи лабораторните методи за изследване стават решаващи за диагностицирането.

Изолиране на вируса. Вземане и подготовка на материала. За вирусологични изследвания на болни птици вземе ексудат от трахеята, или заклани отпаднали в началната фаза на заболяването между дните 2-7 - лигавица на ларинкса, трахеята, конюнктивата, нос и белодробни филийки. Материалът се замразява и се съхранява при -20 ° C или по-ниско. За хистологичните изследвания материал се поставя в 10% неутрален формалин разтвор. От патологичен материал суспензия 1 се получава 5 на разтвор на Хенкс или изотоничен разтвор NaS1 се центрофугира при 1500-2000 1 мин за 15 мин, супернатантата се прибавя към 1000 IU на пеницилин и 500 мкг стрептомицин на 1 мл инкубира в продължение на 3-8 часа при 2-4 ° С. Zatemispolzuyut за заразяване на CE, клетъчна култура или не имунизиран срещу пиле ILT

Инфекция с СЕ. За всяка проба се използват 10 ембриони на възраст между 9 и 12 години. Заразяват Хао убит по време на първите 24 часа след заразяване, ембрионите не се отчитат на живи ембриони на 6-8-ия ден на климата ubivayut.Makroskopicheskie HAO появи след 2,5-3 дни и достига максимум на 5-6 дни. Щамовете на ILT вируса причиняват леки изменения и фокални лезии на ChAO. Нодуларно лезии открити по цялата повърхност Hao, неравномерно - само на мястото на инокулация на вируса. Имайте предвид, че не всички щамове причиняват смъртта на кокоши ембриони при 4-6- дни. трябва да бъдат предприети, за да се идентифицират специфични лезии най-малко 3 пасажи, като се използват Хао, окачени в алантоиден течност от предходния пасаж.

Изолирането на вируса трябва да бъде потвърдено чрез откриване на телефилни включвания на Seifrid, RN, RDP, биоанализ, както и IF и EM.

Инфекция на клетъчни култури. Особено подходящ в този случай култура ембрионални бъбречни клетки и пиле, в която първите промени, наблюдавани понякога още 24 часа след заразяването, и 48-72 часа в клетъчна култура са открити многоядрени гигантски клетки, които могат да бъдат открити Вътрешноядрен включвания. Специфичността на тези промени се доказва от IF или PH. Наблюдение на клетъчната култура се извършва до 6-7 дни за изолиране на първичния вирус също подходящи Vero клетки

Посочване и идентификация на вируса

Откриване на специфични включвания на тялото. ILT вирусни размножава в епителните клетки на лигавицата на ларинкса, трахеята, клоаката, причинявайки остро възпаление на мембраните да образуват Вътрешноядрен включвания. Включва се откриват преди началото на епителна некроза между първото U5-ия ден след интратрахеално инфекция на пилета. В кремовете от конюнктивалното включване се откриват 48 часа след инфекцията. Ядрото, съдържащо включване обикновено се увеличава, се отбелязва хиперхрома на ядрената обвивка. Включва имат закръглена форма, понякога образуват diplokokkov и заемат включване видима небоядисани площ 1/2 -1/3 клетка yadra.Vokrug който се счита типично. Болестта може да бъде диагностицирана въз основа на откриване в рамките на ядрени включвания. За тази цел, слайдовете се получават от остъргвания намазки лигавицата епител, определен в абсолютен метанол за 3-5 мин с разтвор на Giemsa оцветяване боя (боя 1kaplya 1 мл дестилирана вода) в продължение на 2 часа при 37 ° С, след това се промива намазки, се третира с абсолютен метанол, промива се отново, суши се и сърфиране. В положителни случаи, цитоплазмата на епителни клетки е боядисан в бледосин, ядрената мембрана на клетките тъмни, Вътрешноядрен включвания са ясно видими, светло червено, формата варира (сферична или kolbasovidnye), заобиколен от ясно видими светлинни ленти. Техният брой в ядрото 1 до метод 4.Ukazanny понякога позволява в продължение на 3-4 часа ILT диагностицират дори с атипични прояви. Вероятността за откриване на клетки включвания в патологичен материал съществува само в началната фаза на заболяването - между 2-7 дни.

АКО. Откриване Вирусен AG, използвайки специфичен флуоресцентен серум в намазки от трахеална мукоза, конюнктивата от болни пилета (време на остро хода на заболяването) на Hao болни и заразени клетъчни култури. Реакцията се определя по конвенционален метод. По-често се използва директен метод. АКО положителни проби от болни птици, наблюдавани в остър период на заболяването, когато открива Вътрешноядрен включвания и може да изолира вируса в маркировката.

Биооценка. Те го слагат на пилета на възраст 30-90 дни, като прилагат материал, съдържащ вируса, към мукозната мембрана на ларинкса, трахеята, очите, носа, инфраорбиталния синус, клоака. Ако в тестовия материал има вирус, типичните клинични признаци на експериментална инфекция се развиват при инфектирани пилета в продължение на 6-12 дни. Когато заразяването материал в инфраорбитална синус в положителните случаи се развива синузит с оток, секрети от носните проходи и сълзене. Положителната реакция на клоаката пробата е показано от 3-ти до 8-ия ден, но по-често в продължение на 4-5 дни под формата на подуване на лигавицата - бурсата на Fabricius и катарален, хеморагичен или фибринозен възпаление.

Наблюдението на заразените пилета е до 14 дни. Най-често инфекцията се извършва на лигавицата на трахеята и клоаката, защото този метод позволява да се определи вирулентността на щама, както и да се прави разлика от вирусите, които причиняват подобни щети в заразен HAO CE. При интратрахеална инфекция на 4-седмични пилета вирулентен щам CS-1 вирус ILT. Най-високият титър на вируса в трахеята тъкан (106 PFU / гр) е настроена на 2-4-ия ден. По-късно, количеството на вируса драстично намалява и в продължение на 7 дни не е намерено, въпреки вирус антиген в епитела на трахеята и в голям брой открити дори na7-8 ден чрез EIA.

Напоследък естествените инфекции все по-често се проявяват атипично, абортивно, хронично или дори асимптоматично. Изолираните щамове също са по-малко патогенни за СЕ, не винаги водят до тяхната смърт и дори не винаги причиняват патологични промени на лигавиците с директно управление на тествания материал.

RN. Реакцията се определя съгласно конвенционален метод. Най-често в диагностичната практика използвайте метода: - разреждане на вируса и постоянна доза серум. Резултатите от рН се изразяват в индекси на неутрализация. Индексите на неутрализация от 1 до 9 се приемат за отрицателни, от 10 до 49 отрицателни, от 50 и повече - положителни. RN може да се проведе в културата на PEC клетки и 3-8-дневни пилета.

ПРСР. За идентификация на патогена в ПРСР използва набор от пиле антисеруми увеличен на различни вируси птици. ПРСР се поставя по общоприетата методология. За диагностика на птици RDP ILT 1.5% агар при gelgotovyat veronalnom буфер при рН 7.2, както следва: 100 мл гореща дестилирана вода се разтваря 1,84 гр веронал след охлаждане, съставен с дестилирана вода до 1000 мл и се разтварят в получен разтвор от 10.3 g медал. Разтворът се съхранява при 4 ° С. Реакцията е проста в техниката и позволява да се открият около 75% от положителните случаи, установени чрез заразяване с ембриони. RDP е специфичен, но не е достатъчно чувствителен, той се използва главно за ретроспективна диагностика сред възрастни пилета.

Приготвяне на хиперимунни серуми и антигени: Хепаразитни вирусни неутрализиращи серуми се получават при зайци съгласно следната схема. Virus (HAO 01:10 суспензия след центрофугиране при 2500 оборота в минута в продължение на 1 до 30 минути) се прилага интравенозно на зайци в продължение на 3 седмици при 3 пъти седмично (след 1 ден) през първата седмица - 2 мл вторично - 3, в третата - 4 мл. След 7 седмици след първичната имунизация заекът интраперитонеално инжектира 10 мл вирус, а на следващия ден - 15 мл интравенозно. 7 дни след последното приложение на AG, зайците са обезкръвени. Хипермунни заешки серуми се използват в РН за типизиране на ILT вируса.

Приготвяне на хиперимунни утаяващи серуми върху домашни птици. HAO вирус-съдържаща суспензия се центрофугира при 110 разреждане се прилага при възрастни петли аксиларна вена в обем от 1-2 мл в 4 инжекции на интервал от 1 ден, 7 дни почивка, 4 инжекции на интервал от 1 ден. 6-IDD колебливо след последната инжекция, беше взета кръв от сърцето, в случай на неактивен серум се провежда три пъти с въвеждането на вируса дневни интервали, на втория ден от втория кръвна проба е взета. Установено е, че препарати на пречистен ILT вирус, получен от градиент на плътност глицерол-тартарат, по-подходящи за изолиране на ДНК вирион, докато препарати пречистват в перколиране е по-добре да се използва като специфична ELISA за хипертония и получаване на специфични антисеруми. Съгласно вирусни препарати EM ILT пречистват в просмукване, по същество свободен от примеси клетъчни компоненти (везикули).

Идентифициране на вируса с моно AT. Чувствителност ELISA пн AT сравнима с изолиране на вируса, но по-бързо и по-чувствителен от теста Елайза, използвани в АКО заек поликлонални и мишка гуспудине AT AT.

Серодиагностика и ретроспективна диагностика. В редки случаи, особено при хронична инфекция, диагностициране позволява създаването на растеж в титър на антителата при изучаването на сдвоени syvorotok.Odnako този вид изследвания се извършва главно за целите на събиране на доказателства на предишното заболяване на населението, и посочи към разпространението на патогена в определена област. Серумните проби от птицата се изследват два пъти - след 14-28 дни. Повишаване на титър на антитела срещу вируса, а броят на птиците, реагират положително в стадото, показва наличието и разпространението на инфекцията в домакинството и поддържането или намаляване на AT - минало инфекция. За серологичен кръв се взема 14-28-ия ден от началото на заболяването най-малко 5-10 птици с 5 мл всяка. Преди изследването серумът се съхранява в замразено състояние при минус 20-70 ° С. Серумът от болни и болни птици, както и контролните, се инактивират при 56 ° С в продължение на 30 минути.

Приготвяне на антигени за RN и RDP. HAO с ТВЕ вирус характеристика на лезиите се хомогенизира с равно количество буфер изотоничен разтвор с рН 7.2-7.4, към които се добавят антибиотици в размер на 100 единици пеницилин и стрептомицин за 1 мл разтвор. Суспензия: Центрофугирайте на 3000 min за 1-20 min. Тя трябва да седиментни течност се декантира и се използва като антиген, ако тя съдържа вирус от най-малко 105 EIDzo / mlAG съхранява в замразено състояние. Следващият метод е предложен за вирусна концентрация и пречистване на вирус-съдържащ материал беше концентрирана с полиетилен гликол molm 6000, крайна концентрация в virusosoderzhaschey суспензия трябва да бъде равен на 7% Концентрация се провежда при 4 ° С в продължение на 3 часа, концентрира вирус се центрофугира при 3000 об / мин. 30 мин. Инфекциозна активност на получения вирус - 10-6107 EID 50 / ml

RN. Най-чувствителни в сравнение с ПРСР и RID. Той разкрива специфичен АТ при 96-98% от заразените птици, независимо от формата на заболяването. Тази реакция обаче е трудоемка и изисква значително количество СЕ. При СЕ или клетъчни култури реакцията се провежда съгласно конвенционална техника, по-често се използва модифицирането на постоянна доза серум и различни разреждания на вируса. Броят редове съответства на броя на тестовите серуми плюс 2 контролни реда (с нормален и имунен серум), а броят на епруветките в реда се дължи на разреждането на вируса. След контакт (1 час при стайна температура), сместа от серум с всяко разреждане на вируса се инокулира с не по-малко от 4 kOe за ChAO от 0,2 ml. Ембрионите се инкубират при 37 ° С в продължение на 6 дни. При аутопсията са установени специфични промени в ChAO. В RN се препоръчва използването на неразтворена суроватка. Оценката на резултатите се извършва съгласно индекса на неутрализация. Серум с IN10 или по-малко се счита за отрицателен и с индекс повече от 10 - положителен.

ПРСР. Извършва се по стандартния метод, като се използва стандартна АХ. Тази реакция може да разкрие 25-50% от болните птици. Обаче, простият метод за създаване и бързо получаване на резултати дава възможност за проучване на голям брой птици с минимален разход на ресурси и време. Специфичен антиген се получава от ILT клонинг HT от ваксинален вирус. Virussoderzhashuyu суспензия - пелети хомогенизира HAO - концентрирана при използване на 1% разтвор на полиетилен гликол в дестилирана вода или полиетилен гликол (PEG-6000) добавяне към суспензията в размер на 7%.

Антисерумът към ILT вируса се получава чрез хиперимунизация на морски свинчета и птици. В първия случай, концентриран вирус ILT stitrom не по-ниска 108EID5o / ml- което морските свинчета бяха имунизирани както следва: първата имунизация в обем от 0.1 мл интрадермално в плантарната повърхност на двете лапи, втората имунизация - след 7-9 дни в обем от 1 мл подкожно в областта на горната устна - следващите 2 инжекции - след 14-16 и 21-23 дни след втората се извършват по подобен начин. След 10 дни след последното прилагане на AG, морските свинчета са напълно обезкостени. AT ниво DSA обикновено е 1 и 16 по-горе, в лиофилизирано състояние серум запазва активността си 2 години

Птици (ярки и петли на възраст 90-120 дни) giperimmuniziruyut съгласно схемата: първа и втора времена (след 2 дни) бяха имунизирани интравенозно AG специфичен обем от 1 мл, за трети път след 16 дни и четвърти път след 30 дни в виждане-интратрахеално същия обем. След 15 дни след последната имунизация се взема кръвна проба и се изследва за активност и специфичност. Ако серум активност в специфична RDP AG 1:32 или по-висока, тогава птица напълно (от сърцето), се събира кръв, от която серум се лиофилизира и се използва за откриване на АТ в органите и тъканите на болните и мъртви птици. Ако титър на специфичен PA в серумна проба ще бъде по-ниска от 01:32, птицата се имунизира отново с вирулентен вирус ILT при 1: 100 разреждане интратрахеално в обем от 0.5 мл. След 10-12 дни, птиците се обезводняват и серумът се лиофилизира.

Като разтворител, използван за буферирани Phys за получаване гел 0.1М NaCl-разтвор рН 7,2-7,4- фосфатен буферен разтвор, съставен от 9 части разтвор OD5M NaCl и 1 част солна 0.15М фосфатен буфер 7.2 NRC за обслужване, Веронален ацетатен буфер с рН 8,6 с йонна сила 0,1 рН буферен буфер 8,4-8,6. Гелът върху тези буферни разтвори се приготвя чрез изчисляване на 1,5 gigar на 100 ml разтворител. Разтваря агара за 1.5-2 часа на кипяща водна баня, като към стопения агар консервант (риванол, натриев азид Etal.). Горещият агар се излива в 3 ml върху стените на предмета или 35 ml в петриеви чинии, поставени точно хоризонтално. След като агарът се втвърди, плочите могат да се използват в ПРСР. По този начин, за диагностицирането на ILT се препоръчва RDP върху агарен гел, приготвен върху борат или фосфатни буфери. RDP е подходящ за откриване на специфични В в кръвта на пациентите и на възстановени птици, както и хипертония ILT вирус в труповете ptits.Razrabotany условия за получаване на специфичен ILT вирус, дейността PRD 1: 4-1: 32 и в твърда фаза ELISA 1: 265-1 : 4000.

ELISA. Той се оказа по-чувствителни от чувствителността на рН приближава Ако по някаква експериментално инфектирани пилета чрез ELISA и IFA е в състояние да идентифицира АТ по-ранна дата, отколкото в RN. Беше разработен ELISA в твърда фаза за откриване на специфичен вирус на АТ в ILT в серумите на ваксинираните птици. С помощта на метода на шах титруване се развива сенсибилизираща доза от антигени и разреждане на имунопероксидазния конюгат. При ELISA специфични антитела могат да бъдат открити в титри от 1: 100-1: 200 в серумите на ваксинираните птици. Подобни титри в RN и RDP са съответно 1: 8-1: 32 и 1: 2-1: 16 (12). ELISA и рН (микрометър) бяха успешно използвани за откриване на АТ в стада със субклинична ILT. Откриването на postvaccinal AT към вируса на заболяването в серумите на пилета, като се използва ELISA, е успешно една седмица след ваксинацията. Подобрен ELISA метод също се предлага чрез въвеждане на комплекс авидин-биотин-ензим в реакцията. Той е подходящ и за оценка на пост-ваксинален имунитет.

Диференциална диагностика. При определянето на диагнозата за ILT е необходимо да се изключат НВ, едра шарка, IBC, инфекциозен ринит, хронична пастюрелоза, респираторна микоплазмоза и др.

Имунитет. Болестта се придружава от дълъг или през целия вирус. От трахеята на болните птици вирусът е изолиран за 2 години. През 7-ия, 8-ия ден след инфекцията вълните от трахеята имаха неутрализираща активност на вируса. С ILT се установява значението на клетъчния имунитет. Имуногенността на ваксината зависи от нейната реактогенност, има тясна връзка между интензитета на имунитета и титъра на BHA (в културата на бъбречните клетки на СЕ). В редица случаи имунитетът се е появил по-рано, отколкото се появяват хуморални АТ. Образуването на VNA и забавения тип свръхчувствителност не корелира с интензивността на имунитета на ваксинираните домашни птици.

В страните от Руската федерация и ОНД прилага суха вирус-ваксина от парчета TSNIIPP. Те осигурен метод за имунизация - масажиране лигавицата ваксина горната купол клоака. Имунитетът настъпва след 7-10 дни и продължава при повечето птици през целия период на употреба. Аерозолният метод за ваксиниране с това лекарство е разработен. Той предлага като живи вирусни ваксини от естествен отслабени щам VNIIBP, който може да се прилага чрез втриване в лигавицата на клоака, и аерозоли. При използване на този щам GA активност на 1 128-1 512 прилагането му на конюнктивата при 1,000 EIDzo висок ефект се постига, което се оценява от нивото на анти-НА vRZGA Сероконверсия най-малко 80% и повече геометричен среден титър дневник 4 показват силен имунитет.

Освен живи ваксини култури, използвани в Япония с клетъчно-свързан жива ваксина от вирус ларинготрахеит CE в инфектираните клетки, който съдържа много по-вирус-специфични протеини в свободни вириони. Имунитет при ваксинирани домашни птици се развива на шестия ден след имунизацията. Дори в 10-кратна доза ваксината е безопасна за пилетата.

Той предлага като жива ваксина срещу ILT и болестта на Марек, което да предизвика имунитет към двата вируса в подкожно и интрамускулно инжектиране. Ефективността на едновременна ваксинация на пилета срещу ND iILT Оказа се, че щама на ваксината Ла Сота няма инхибиторен влияние nareproduktsiyu парчета VNIIBP вирус ILT в FE. Биологична активност iimmunogennost virusvaktsiny пилета ILT от клон НТ не се променят по време на съхранение в продължение на 12 месеца при 2-6 ° С

Предпочитан метод на имунизация - конюнктивална вливане ваксина или неговото прилагане под формата на ваксинация аерозолен спрей, ваксината, съдържаща вируса, може да се придружава от нежелани ефекти, особено в присъствието на микоплазма инфекция на фермата. Когато имунитет аерозол ваксинация се развива в рамките на 4-5 дни и продължава до една година. В момента се използва VRF VNIIBP VNIIVViM първата ваксина и след прилагане двойно впръскване (5-7,5 LG ЕИ 5о) създаде имунитет във всички 5-6 - пилета яйчни родословни седмици и 80% пилешки породи пилешко месо. След 4,5 месеца след ваксинирането, 90% от пилетата са запазили силен имунитет. Ваксината се получава от VNIIVViM най-НТ tenuirovannogo част, е по-малко реактогенен когато аерозол приложение. Въпреки високата биологична активност и areaktogennost ваксината срещу ILT клонинг HT не се препоръчва да го използвате за ваксиниране на пилета на различна възраст, и когато не са налице предпоставки за създаване на желаната концентрация в къщата. Ваксина срещу ILT от клон НТ в клоаката метод на прилагане в доза от 11,240 ЕИ 5 ° над и образува 30-40 дни пилета силен имунитет след еднократна ваксинация.

Относителната ефективност на инактивирани ваксини са противоречиви данни в литературата за получаване на инактивиран препарат се използва р-propilakton, etilenimin формалин. Единична имунизация на пилета с инактивирана емулсионна ваксина съобщава за устойчивостта на пилетата към инфекция в рамките на 12 месеца. По този начин е получена ефективна инактивирана ваксина, която се препоръчва за използване в стопанства с често разпространение на ILT.

Генетично проектирани ваксини. Независимо от методите за прилагане на жива вирусна ваксина, птицата има доста дълъг пренос на ваксинния вирус. Атенюираните ваксини могат да предизвикат латентна инфекция. Разработените генетично модифицирани ваксини са свободни от този недостатък. В комбинация с хигиенните мерки такива ваксини биха могли да доведат до изкореняване на ILT до 2000 г. в домашни птици hozyaystvah.Opisany методи за конструиране мутант ILT вирус, в която генът на ТК (тимидин киназа) инактивира чрез мутации на различен тип: делеции (например ДНК област между двете места, Narl), инсерции или делеции на чужда ДНК и поставете. Тези мутанти не произвеждат функционална ТК и са атенюирани. Генът ILT вирус TK могат да бъдат интегрирани хетероложни гени, кодиращи AG птичи патогени: вируси MB, NB, IBK, ретровируси, и т.н. Такива варианти на ILT вируса могат да се използват като вектори на ваксина, които индуцират имунен отговор. Положителният резултат, когато се използва за предотвратяване на специфичен гликопротеин ILT пречиства чрез афинитетна хроматография.

Оценяване на имунитета след ваксината. Пилетата, възстановени с инфекциозен ларинготрахеит, при естествени условия придобиват практически имунитет през целия живот. Установено е, че двойната свързана аерозол ваксиниране на птици срещу Северна Дакота, ILT и едра шарка не инхибира клетъчен и хуморален имунитет параметри. Повечето изследователи на имунизация се оценяват от нивото на VNA и напрежение - чрез контролиране zarazheniya.Ustanovlena тясна връзка между интензивността на титъра на имунитет и в първите 2 седмици след ваксинацията. В редица случаи пилетата могат да бъдат резистентни към инфекция, но са серонегативни, което показва, че имунното състояние настъпва по-рано от появата на AT в кръвта.

В серумите на ваксинирани пилета на 10-14-ия ден беше открита VNA. В малки заглавия те се откриват при птици в РН на 55 седмици след ваксинацията. Беше установена пряка връзка между нивото на защита на пилетата след ваксинацията и титрите на BHA. При процента на пост-ваксинираните антитела G 76, Mb, 1: 10 и G8, процентът на случаите на птици след експериментална инфекция е съответно 0,45, 55 и 100%. Птица, имунизирана cloically, не се заразява с интратрахеална инфекция, а оцелелият след интратрахеална ваксинация остава имунна срещу инфекцията в cloaca. В тази връзка, ваксината индуцира имунитет се преценява чрез присъствието на ВНА в серума на ваксинираните пилета, както и на резултатите от биоанализи (клоаката реакция). За да се оцени интензивността на имунитета на птиците след ваксинация срещу ILT, могат да се използват ПРСР и RIEF, но те са по-малко показателни. Асоциацията на титри АТ с вируса и вирусната изолация не е проучена.

Пасивен имунитет. Инфекцията на еднодневни пилета от ваксинирани птици доведе до 40% заболеваемост и смъртност - смъртността на пилета, получени от неимунни родители, е 100%. Пилетата, съдържащи VNA в титър 1:76, не защитават потомството и в тялото могат да възпроизведат вируса в ранна възраст.

Споделяне в социалните мрежи:

сроден
Нюкасълска болест: Нюкасълска болест (псевдо-птица, атипична чума по птицитеНюкасълска болест: Нюкасълска болест (псевдо-птица, атипична чума по птиците
Заболявания на пуйки: gistomonoz (черна глава), инфекциозен синузит (инфекциозен ринит),…Заболявания на пуйки: gistomonoz (черна глава), инфекциозен синузит (инфекциозен ринит),…
Болести и профилактика на пуйкитеБолести и профилактика на пуйките
Ваксиниране на пилета срещу болестите на Нюкасъл и МарекВаксиниране на пилета срещу болестите на Нюкасъл и Марек
Предотвратяване и лечение на астма boyzene berryПредотвратяване и лечение на астма boyzene berry
Болести на пуйки и тяхното лечениеБолести на пуйки и тяхното лечение
Козлови болести: превенция и лечениеКозлови болести: превенция и лечение
Имунодефицитност и принципите на неговото лечениеИмунодефицитност и принципите на неговото лечение
Вирусен хепатит на патици: вирусен хепатит от патица (хепатит вирусис анатум) - остърВирусен хепатит на патици: вирусен хепатит от патица (хепатит вирусис анатум) - остър
Ветеринарна и санитарна оценка на продуктите за кланеВетеринарна и санитарна оценка на продуктите за клане
» » Инфекциозен ларинготрахеит на птиците - инфекциозни заболявания - инфекциозни - вирусни, птичи заболявания
© 2018 bgkedfort.ru